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细胞培养中出现颗粒或黑点的原因
浏览次数:122发布日期:2019-11-25

一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点或颗粒生成。首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊.污染包括细菌污染、支原体污染等。


如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:


(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸。


(2)血清质量不好,反复冻融的结果。


(3)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长。


(4)配制培养基的水质、容器不合格.可应用离心、过滤的方法去除这些黑点。


细胞培养中出现黑点或颗粒解决办法:


1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理。


2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能是以下几种情况。


a、是「黑胶虫」,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。「黑胶虫」可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随细胞传代而传代。「黑胶虫」与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是 10 年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的「黑胶虫」,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,如四季青等稍大点的厂家,产品里这种现象就少见了。


b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。


c、是核糖体,也可能是杂质。

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