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ELISA捕获包被法检测抗体原理
浏览次数:165发布日期:2020-07-06

做试验的时分你知道ELISA捕获包被法检测抗体原理和进程吗,上海纪宁实业有限公司来奉告你。


    一、原理
    捕获包被法(亦称反向间接法)ELISA,首要用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定。以现在常用的IgM测定为例,因血清中针对某种抗原的特异性IgM和IgG一起存在,则后者可烦扰IgM的测定。因此先将全部血清IgM(包含异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性IgM。IgM抗体的检测用于盛行症的前期确诊中。先用抗人IgM抗体包被固相,以捕获血清标本中的IgM(其中包含针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM)。然后参与抗原,此抗原仅与特异性IgM相结合。继而加酶符号针对抗原的特异性抗体。再与底物作用,呈色即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性感染的前期确诊。类风湿因子(RF)相同能烦扰捕获包被法测定IgM抗体,导致假阳性反响。因此中和IgG的间接法近来颇受喜爱,用这类试剂检测抗CMV IgGM和抗弓形虫IgM抗体已获成功。


    捕获法测抗体的简明操作进程:
   1.特异性捕获抗体的包被,先把能特异性结合待测抗原的抗体固定于固相载体外表;

   2.参与待测样品,经过固定在载体外表的针对该抗原的抗体固定于载体外表;

   3.参与特异性抗原以及针对该特异性抗原的酶标抗体;

   4.参与酶促反响底物,发生显色反响,显色的深浅与待测抗体的量成正比。


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