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免疫组化分几步呢?
浏览次数:79发布日期:2020-07-27

1.切片,烤片60℃,1h;

2.脱蜡及复水:二甲苯10min,百分之百乙醇5min,95%乙醇5min,90%乙醇5min,85%乙醇5min,80%乙醇5min, 75%乙醇5min,60%乙醇5min,50%乙醇5min,30%乙醇5min,自来水1min,双氧水1min;

3.1份30%H2O2加10份蒸馏水,室温10min,蒸馏水洗3次,每次3min;

4.微波修复:将切片浸入0.01M枸橼酸缓冲液,微波中大火力(98℃-100℃)加热至欢腾,冷却(约5-10min),重复两次;

5.将切片天然冷却至室温,PBS洗刷3次,每次5min;

6.封闭,5%BSA,室温20min,甩去多余液体;

7.滴加一抗,37℃,1h,或者4℃过夜;

8.PBS洗刷3次,每次3min;

9.滴加二抗,37℃,15-30min;

10.PBS洗刷3次,每次3min;

11.滴加SABC,37℃, 30min;

12.PBS洗刷3次,每次5min;

13.1ml蒸馏水中别离滴加显色剂,混匀;

14.DAB显色剂装备好后,滴加于切片,室温,镜下检测反应时间(约5min);

15.自来水冲刷干净,过蒸馏水;

16.苏木素复染2min,自来水冲刷;

17.脱水:30%乙醇3min,50%乙醇3min,70%乙醇3min,80%乙醇3min,90%乙醇3min,95%乙醇3min,百分之百乙醇3min,二甲苯20min;

18.树胶封片,镜检。

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