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ELISA试剂盒技术经验总结出的严格注意(供参考)
浏览次数:79发布日期:2020-12-28

根据我公司进口ELISA试剂盒实验技术部多年的经验以及客户们的咨询问题总结,整理分析出了几个需要严格注意的方面,实验者们随上海恒远来看一看吧(供参考)。

 1. 读板时板底不清洁:难免洗板后板底有水渍,这也可能导致读数不准。

 2. 温育温度的选择

说明书表明的温度可有两种(①37℃下1小时、②43℃下45分钟),从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看,在较低的温度下反应较长的时间zui为完全。上海恒远生物建议在临床ELISA试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

 3. 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉:曾用洗瓶直接冲洗板。后来虽然也用枪逐孔洗板,但对此注意不够。

 4. 加终止液时应避免产生气泡:终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。

 5. 加样板过多、加样速度慢,造成各孔反应时间不均一:但温度高时,加样时间过长将导致各孔时间的反应时间不均一;还使得孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。如果连续做好几块板,则有可能使某些板不能及时洗板,也导致孵育时间人为延长。

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