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中性转化酶(NI)测试盒_蔗糖系列_分光光度法

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  50管/24样
  • 简单描述
  • 中性转化酶(NI)测试盒_蔗糖系列_分光光度法由上海纪宁生物公司提供,包括NI检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

中性转化酶(NI)测试盒_蔗糖系列_分光光度法

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/24样

注   意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据适 pH,将高等植物Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。

NI主要存在于细胞质中,负责分解细胞质中蔗糖为果糖和葡萄糖。

中性转化酶(NI)测试盒_蔗糖系列_分光光度法

测定原理:

NI催化蔗糖分解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算NI活性


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自备用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入25mL试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;

试剂三:液体30mL×1瓶,4℃保存;

NI活性计算:

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.001;x为标准品浓度(μg/mL),y为吸光值。

(1)按蛋白浓度计算:

单位的定义:37℃每mg蛋白每分钟产生1μg还原糖定义为一个酶活性单位。

NI活性(μg /min/mg prot)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr ) ÷T=20.8×(ΔA +0.001) ÷Cpr

(2)按鲜重计算:

单位的定义:37℃每g组织每分钟产生1μg还原糖定义为一个酶活性单位。

NI活性(μg /min/g 鲜重)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(W×V1÷V2) ÷T=20.8×(ΔA +0.001) ÷W 

V1:加入反应体系中样本体积,0.2mL;V2:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,30min; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。


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