NADP磷酸酶(NADPase)测试盒(辅酶Ⅱ系列)

测定方法：分光光度法

产品规格：50管/48样

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

NADPase主要存在于植物组织中，是生物体内催化NADP+降解为NAD+的酶，与NADK一起调控NAD和NADP之间的平衡。

测定原理：

NADPase能够催化NADP+水解为NAD+和无机磷的反应，通过测定无机磷的量来测定NADPase活性。

所需的仪器和用品：

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

NADP磷酸酶(NADPase)测试盒(辅酶Ⅱ系列)

试剂的组成和配制：

提取液：60mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体30 mL×1瓶， 4℃保存。

试剂二：粉剂×5支，-20℃保存；用时每支加入1 mL试剂一充分溶解备用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

试剂三：粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水，溶解后4℃可保存一周。

试剂四：粉剂×1瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水，溶解后4℃可保存一周。

试剂五：液体 25mL×1 瓶，室温保存。

试剂六：10mmol/L 标准磷贮备液 10mL×1 瓶，4℃保存。

0.5μmol/mL 标准磷应用液配制：将试剂六20倍稀释，即取 0.5mL试剂六加9.5蒸馏水，充分混匀。

定磷试剂的配制：按H2O: 试剂三:试剂四:试剂五=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷试剂

应为浅，若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。

注 意：配试剂好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

样本的前处理：

按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

NADPase主要存在于植物组织中，是生物体内催化NADP+降解为NAD+的酶，与NADK一起调控NAD和NADP之间的平衡。

测定原理：

NADPase能够催化NADP+水解为NAD+和无机磷的反应，通过测定无机磷的量来测定NADPase活性。