(辅酶Ⅱ系列)肌酸激酶(CK)测试盒
(辅酶Ⅱ系列)肌酸激酶(CK)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/96样
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。
(辅酶Ⅱ系列)肌酸激酶(CK)测试盒
测定原理:
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加10mL蒸馏水溶解。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。
工作液:临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1混合。使用前37℃温育2min。
粗酶液提取:
1.组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心15min。
2.血清样本:直接测定。
测定操作表:
1. 酶标仪预热30min,调节波长至340nm。
2.在96孔板中加入40μL样本和60μL蒸馏水,后加入100μL工作液,立即混匀,37℃下测定初始吸光值A1与1min后的吸光值A2,ΔA=A2-A1。