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谷胱系列还原型(GSH)测试盒_分光光度法

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • 谷胱系列还原型(GSH)测试盒_分光光度法由上海纪宁生物公司提供,包括GSH检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

谷胱系列还原型(GSH)测试盒_分光光度法

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/48样

注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

GSH是细胞内最主要的抗氧化巯基物质,在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值(GSH/GSSG)是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此,测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。

测定原理:

DTNB与GSH反应生成复合物,在412nm处有特征吸收峰;其吸光度与GSH含量成正比。


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自备仪器和用品:

可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。


试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体×1瓶,4℃避光保存。

谷胱系列还原型(GSH)测试盒_分光光度法

粗酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3.血清等液体:直接测定。

GSH测定操作:

1. 分光光度计预热30min,调节波长到412 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂二置于25℃(一般物种)或者37℃(哺乳动物)水浴中保温30min。

3. 空白管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL蒸馏水,700μL试剂二,200μL试剂三,混匀静置2min后测定412 nm吸光度A1。

4. 测定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL上清液,700μL试剂二,200μL试剂三,混匀静置2min后测定412 nm吸光度A2。

注意:空白管只需要测定一次。




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