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GSH过氧化物酶(GPX)测试盒谷胱系列_分光法

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • GSH过氧化物酶(GPX)测试盒谷胱系列_分光法由上海纪宁生物公司提供,包括GPX检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

GSH过氧化物酶(GPX)测试盒谷胱系列_分光法

测定方法:_分光光度

产品规格:50管/48样

注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

GSH-Px是(GSH)氧化还原循环中催化还原型(GSH)氧化的主要酶之一。GSH-Px不仅能够特异地催化还原型(GSH)与ROS反应,生成氧化型(GSH)GSSG,从而保护生物膜免受ROS的损害,维持细胞的正常功能;而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。

GSH过氧化物酶(GPX)测试盒谷胱系列_分光法

测定原理:

GSH-Px催化有机过氧化物氧化GSH,产生GSSG;(GSH)还原酶(GR)催化NADPH还原GSSG,再生GSH,同时NADPH氧化生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340 nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。


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试剂组成和配置:

试剂一:液体100mL×1瓶,室温保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体20μL×1支,-20℃保存。

试剂四:液体200μL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3.血清等液体:直接测定。

测定操作:

1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。

2. 混合试剂在25℃或者37℃(哺乳动物)水浴中预热30min。

3. 混合试剂配制:临用前,在试剂二中加入试剂一40 mL,充分震荡溶解后加入全部试剂三,混匀。(注意:必须现配现用,当天使用完)

4.试剂四的稀释: 吸取21.5μL试剂四,加入5mL水充分混匀,临用前配制,配制好的试剂当天使用。

5. 测定管:依次在1mL石英比色皿中加入100μL上清液、800μL预热的混合试剂、100μL稀释后的试剂四, 迅速混匀后于340nm处测定第30 s和第210s的吸光值,分别记为A1和A2,△A= A1﹣A2。


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