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(GSH)还原酶(GR)测试盒谷胱系列_分光光度法

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • (GSH)还原酶(GR)测试盒谷胱系列_分光光度法由上海纪宁生物公司提供,包括GR检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

(GSH)还原酶(GR)测试盒谷胱系列_分光光度法

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/48样

注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶,是(GSH)氧化还原循环的关键酶之一(通常昆虫中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH还原GSSG生成GSH,有助于维持体内GSH/GSSG比值。GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用,此外GR还参与抗坏血酸-(GSH)循环途径。

(GSH)还原酶(GR)测试盒谷胱系列_分光光度法

测定原理:

GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH,同时NADPH脱氢生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在该波长无吸收峰;通过测定340 nm吸光度下降速率来测定NADPH脱氢速率,从而计算GR活性。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水

试剂组成和配置:

试剂一:液体120mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×2支,-20℃保存。临用前加入1.2mL蒸馏水,混匀。

试剂三:粉剂×2支,-20℃保存。临用前加入0.6mL蒸馏水,混匀。

粗酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。

2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心15min,取上清置于冰上待测。

3.血清等液体:直接测定。


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操作步骤:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂一置于25℃(普通物质)或者37℃(哺乳动物)中预热30min。

3. 测定管:取微量石英比色皿或96孔板,依次加入10μL试剂三,20μL试剂二,150μL试剂一,20μL上清液,混匀,于340nm迅速测定初始吸光度和180 s吸光度,记为A测1和A测2,△A测定管= A测1﹣A测2。




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