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硫氧还蛋白氧化还原酶TrxR测试盒_谷胱系列

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • 硫氧还蛋白氧化还原酶TrxR测试盒_谷胱系列由上海纪宁生物公司提供,包括TrxR检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

硫氧还蛋白氧化还原酶TrxR测试盒_谷胱系列

测定方法:_分光光度法

产品规格:50管/48样

注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

TrxR是一种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶,属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员,与硫氧还蛋白以及NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR与GR活性类似,催化GSSG还原生成GSH,是(GSH)氧化还原循环关键酶之一。

硫氧还蛋白氧化还原酶TrxR测试盒_谷胱系列

测定原理:

TrxR催化NADPH还原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412 nm有特征吸收峰,通过测定412nm波长处TNB的增加速率,即可计算TrxR活性。

自备仪器和用品:

低温离心机、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体120mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体2mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:粉剂×1管,4℃保存。临用前加入2mL蒸馏水溶解。


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粗酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3.  血清等液体:直接测定。

TrxR测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到412nm,用蒸馏水调零。

2. 试剂一在25℃(一般物种)或者37℃(哺乳动物)预热30min。

3. 空白管:取微量玻璃比色皿或96孔板,加入20μL试剂二,20μL试剂三,160μL试剂一,迅速混匀后于412 nm测定10 s和310 s吸光度,记为A1和A2。△A空白管=A2-A1。

4. 测定管:取微量玻璃比色皿或96孔板,加入20μL试剂二,20μL试剂三,140μL试剂一,20μL上清液,迅速混匀后于412 nm测定10 s和310 s吸光度,记为A3和A4。△A测定管=A4-A3。

注意:空白管只需测定一次。



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