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酯酶系列_乙酰酯酶(AchE)测试盒_微量法

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  100管/96样
  • 简单描述
  • 酯酶系列_乙酰酯酶(AchE)测试盒_微量法由上海纪宁生物公司提供,包括AchE检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

酯酶系列_乙酰酯酶(AchE)测试盒_微量法

测定方法:微量法

产品规格:100管/96样

注   意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

AchE属于Ser水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE催化乙酰(Ach)水解,在神经传导调节中起重要作用。


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酯酶系列_乙酰酯酶(AchE)测试盒_微量法

测定原理:

AchE催化Ach水解生成二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm处有吸收峰,通过测定412 nm吸光度增加速率,计算AchE活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1支,4℃保存。临用前加入1.3 mL试剂二,充分震荡溶解。

试剂四:粉剂×1支,4℃保存。临用前加入1.3 mL试剂二,充分震荡溶解。

粗酶液提取:

1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清液待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体:直接测定。

测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到412 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂二置于37℃水浴中预热30min。

3. 取微量石英比色皿/96孔板,依次加入20μL上清液、160 μL试剂二、10μL试剂三和10μL试剂四,迅速混匀,于412nm处测定3min内吸光值变化,第10s吸光值记为A1,第190s吸光值记为A2。△A测定管=A2-A1。


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