酯酶系列_酸性磷酸酶(ACP)测试盒-微量法
酯酶系列_酸性磷酸酶(ACP)测试盒-微量法
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
酯酶系列_酸性磷酸酶(ACP)测试盒-微量法
测定原理:
在酸性环境中,ACP催化对硝基苯磷酸二钠水解生成4-硝基,在405nm有特征光吸收;通过测定405nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。
自备仪器和用品:
酶标仪、96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体60 mL×2瓶,4℃保存。
试剂二:液体50 mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体50 mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1 mL试剂一)进行冰浴匀浆,4℃、10000g离心10 min,取上清液待测。
2. 细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1 mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3 min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
3. 血液可直接测定,或者适当稀释后测定。