山梨-醇脱氢酶(SH)测试盒_糖代谢系列

测定方法：分光光度法

产品规格：50管/48样

注   意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：                           

SH（EC 1.1.1.14）催化山梨-醇脱氢生成果糖，是调控生物体内山梨-醇含量的关健酶之一。

山梨-醇脱氢酶(SH)测试盒_糖代谢系列

测定原理：

SH催化山梨-醇脱氢生成果糖，同时还原NAD+生成NADH，测定340nm吸光度增加速率可以计算SH活性。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前每瓶加入15mL蒸馏水，用不完的试剂仍4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入15mL蒸馏水，用不完的试剂仍-20℃保存。

粗酶液提取：

1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、血清（浆）样品：直接检测。