麦芽糖含量测试盒_糖代谢系列
麦芽糖含量测试盒_糖代谢系列
测定方法:分光光度法
产品规格:50管/24样
注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
麦芽糖是由两个葡萄糖单位经由α-1,4 糖苷键连接而成的二糖,又称麦芽二糖。麦芽糖是淀粉、糖原、糊精等大分子多糖类物质在β-淀-粉酶催化下的主要水解产物,再经麦芽糖酶催化,则被水解成两个葡萄糖分子。麦芽糖不仅参与了生物体内糖代谢,其在食品和医药工业等行业也着广泛应用,是产品质量控制的重要指标之一。
测定原理:
麦芽糖酶将样品中麦芽糖水解为葡萄糖; 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替-比林偶联酚,生成有色化合物,在 505 nm 有特征吸收峰。
麦芽糖含量测试盒_糖代谢系列
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水
试剂的组成和配制:
试剂一:液体 35mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加 3 mL 试剂一溶解后待用,用不完的试剂分装后-20℃保存;
试剂三:液体 25ml×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 25ml×1 瓶,4℃保存;
麦芽糖提取:
按照样本质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一),研磨成匀浆,95℃水浴 10 分钟(盖紧,防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清液备用。
测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 505nm,蒸馏水调零
2、 混合试剂的配制:使用前将试剂三和试剂四 1:1 等体积混合,用多少配多少。
3、 测定管:取 200μL 上清,加入 100μL 试剂二,混匀,55℃反应 60 min,待测。
对照管:取 200μL 上清,加入 100μL 试剂一,混匀,55℃反应 60 min,待测。