糖代谢系列_总多糖含量测试盒
糖代谢系列_总多糖含量测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/96样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
多糖是生物体中广泛存在的物质,是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,它是生物体内重要的生物大分子,是维持生命活动正常运转的基本物质之一。
测定原理:
利用水提醇沉法提取总多糖,苯-酚-硫酸法测定总多糖含量。
糖代谢系列_总多糖含量测试盒
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。
试剂的组成和配制:
试剂一:12mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:无水乙醇,自备;
试剂三:浓硫酸,自备。
总多糖提取:
样本烘干粉碎,称取约0.05g样本,加入1mL水,充分匀浆。100℃水浴提取2h(必须盖紧盖子防止水分流失),冷却后10000g离心10min,取上清。吸取0.2mL上清,慢慢加入0.8mL无水乙醇,混匀后4℃静置过夜,10000g离心10min,弃上清,沉淀中加入1mL水,充分混匀溶解沉淀。
测定步骤
1、酶标仪预热30min以上,调节波长至490nm。
2、吸取200µL上清,加入100µL试剂一和0.5mL浓硫酸,混匀后90℃水浴20min,流水冷却。取200µL加入酶标板,于490nm下测定吸光值A。