糖代谢系列_几丁质酶测试盒
糖代谢系列_几丁质酶测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中。而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。
糖代谢系列_几丁质酶测试盒
测定原理:
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与对二甲氨基苯-甲醛产生红色化合物,在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
自备实验用品及仪器
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(土壤样品专用)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体105mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。(若出现结晶,可80℃左右加热溶解后使用)
试剂三:液体5mL×1瓶,4℃保存。
试剂四:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
粗酶液提取:
1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。
2.真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。
3.培养液:直接测定。