糖代谢系列_纤维素酶(CL)
糖代谢系列_纤维素酶(CL)
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
CL(EC 3.2.1.4)存在于细菌、真菌和动物体内,能够催化羧甲基纤维素降解,是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。
糖代谢系列_纤维素酶(CL)
测定原理:
采用蒽酮比色法测定CL催化羧甲基纤维素钠降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、浓硫酸和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体6mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体40mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存; 临用前加入5mL蒸馏水和45mL浓硫酸充分溶解待用。
样品测定的准备:
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。