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花青素合成系列_肉桂酸-4-羟化酶C4H测试盒

  • 更新时间:  2022-08-03
  • 产品型号:  100管/96样
  • 简单描述
  • 花青素合成系列_肉桂酸-4-羟化酶C4H测试盒由上海纪宁生物公司提供,包括C4H检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍。
详细介绍

花青素合成系列_肉桂酸-4-羟化酶C4H测试盒

测定方法:微量法

产品规格:100管/96样

注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

C4H 又称反式肉桂酸-4-单氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌类中,该酶催化肉桂酸羟化作用产生 4-香豆酸盐,是苯丙烷途径中继 L-苯丙-氨酸解氨酶之后的第二个关键酶。

花青素合成系列_肉桂酸-4-羟化酶C4H测试盒

测定原理:

C4H 催化肉桂酸和 NADP 生成 4-香豆酸盐和 NADPH,在 340nm 下测定 NADPH 生成速率,即可反映 C4H 活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 25 mL×1 瓶, 4℃保存;

试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;

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粗酶液提取:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。


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