花青素合成系列_ 植物花色苷测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/96样

注　意：正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

花青素合成系列_ 植物花色苷测试盒

测定意义：

花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素，属黄酮类化合物。花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中，使其呈现由红到紫等不同颜色，是植物主要的呈色物质。

测定原理：

采用 pH 示差法测定花色苷含量，当 pH 为 1.0 时花色苷在 530nm 处有大吸收峰,而当 pH 为 4.5 时,花色苷转变为无色查尔酮形式,在 530 处无吸收峰, 利用此特性分别测定在不同pH 下的 530nm 和 700nm 处的吸光度值。pH 示差法减少了溶液 pH 和溶剂差异的影响，排除了其他非花色苷类物质对检测结果的干扰。

需自备的仪器和用品：

酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、超声波清洗器、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

提取液：液体 100 mL× 1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 20 mL× 1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 20 mL × 1 瓶，4℃保存；

花色苷的提取：

按照样品质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 样品，加入 1mL 提取液），充分匀浆后转移到 EP 管中，提取液定容至 1 mL，盖紧后超声波提取 2 h，8000 g，常温离心 10 min，取上清液待测。

测定步骤：

1、酶标仪预热 30min 以上；试剂一和试剂二 25℃（室温）预热 10min 以上；

2、取 20 µL 上清液和 180 µL 试剂一（相当于稀释 10 倍），40℃水浴 20min，分别测定 530nm 和 700nm 处的吸光值，分别记为 A1 和 A2。

3、 取 20 µL 上清液和 180 µL 试剂二（相当于稀释 10 倍），40℃水浴 20min，分别测定 530nm和700nm 处的吸光值，分别记为 A3 和 A4。4、 计算△A=(A1-A2)-(A3-A4)