查尔酮异构酶(CHI)测试盒_花青素合成系列

测定方法：分光光度法

产品规格：50管/48样

注　意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

查尔酮异构酶(CHI)测试盒_花青素合成系列

测定意义：

查尔酮异构酶(Chalcone isomerase, CHI)是第一个被认识的黄酮类化合物合成相关酶，也是黄酮代谢途径中的关键酶之一。查尔酮异构酶和查尔酮合酶一起构成了黄酮类化合物生物合成的限速酶。

测定原理：

查尔酮异构酶（CHI）催化查尔酮环化形成 4,5,7-三羟基黄烷酮，通过测定 381nm 下的吸光度变化表示 CHI 的活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成：

提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；用时加入 50mL 试剂一充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存。

粗酶液提取：

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 381nm，蒸馏水调零。

2、 样本测定表

在1mL 玻璃比色皿中加入 50µL 上清和 950µL 试剂二，立即混匀并记录 381nm 下初始吸光值 A1 和 37℃保温 30min 后的吸光值 A2。计算 ΔA＝A2-A1。