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谷氨-酰胺合成酶(GS)测试盒_氨基酸代谢系列

  • 更新时间:  2022-08-03
  • 产品型号:  50管/24样
  • 简单描述
  • 谷氨-酰胺合成酶(GS)测试盒_氨基酸代谢系列由上海纪宁生物公司提供,包括GS检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍。
详细介绍

谷氨-酰胺合成酶(GS)测试盒_氨基酸代谢系列

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/24样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷-氨酸合成谷氨-酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨-酰胺也是氨的主要储存和运输形式。

谷氨-酰胺合成酶(GS)测试盒_氨基酸代谢系列

测定原理

GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷-氨酸合成谷氨-酰胺;谷氨-酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下形成的络合物在540nm处有大吸收峰,可用分光光度计测定。

所需的仪器和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制

提取液:30mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:12mL×1瓶,-20℃保存,临用前37℃预热20min,充分混匀,如有沉淀,静置10min,取上清待用。

试剂二:12mL×1瓶,-20℃保存,临用前37℃预热20min,充分混匀,如有沉淀,静置10min,取上清待用。

试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。用时每瓶加入5mL蒸馏水充分溶解待用。

试剂四:15mL×1瓶,4℃保存。

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样本测定的准备

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。


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