谷丙转氨酶(GPT/ALT)测试盒_氨基酸代谢系列
谷丙转氨酶(GPT/ALT)测试盒_氨基酸代谢系列
测定方法:分光光度法
产品规格:50管/24样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GPT(EC 2.6.1.2)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化氨基酸和酮酸转氨基反应,在氨基酸代谢中具有重要作用。此外,哺乳动物肝细胞GPT活性很高,当肝细胞坏死,GPT释放到血液中,血清GPT活性显著增高。因此,GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害敏感的检测指标。
谷丙转氨酶(GPT/ALT)测试盒_氨基酸代谢系列
测定原理:
GPT催化丙-氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应,生成丙酮酸和谷-氨酸;加入2,4-二硝-基苯肼溶液,不仅终止上述反应,而且与酮酸中的羰基加成,生成丙酮酸苯腙;苯腙在碱性条件下呈红棕色,可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。
试验中所需的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:30mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体5 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂二:液体5 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂三:液体50 mL×1瓶,4℃保存;
样品测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。