氨基酸代谢系列_鸟-氨酸转氨酶(OAT)测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/96样

注   意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

脯-氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯-氨酸代谢因其初始底物不同，分为谷-氨酸( Glu) 和鸟-氨酸( Orn) 两条合成途径。鸟-氨酸转氨酶( δ-OAT) 是 是以鸟-氨酸为前体合成脯-氨酸途径的关键酶，对植物适应逆境胁迫起关键作用。

氨基酸代谢系列_鸟-氨酸转氨酶(OAT)测试盒

测定原理：

鸟-氨酸和α-酮戊二酸在鸟-氨酸转氨酶和NADH作用下发生氨基转移反应生成吡咯啉-5-羧酸（P5C），同时产生NAD，通过检测340nm处的吸光度的变化可反映出鸟-氨酸转氨酶活性的高低。

自备实验用品及仪器：

天平、低温离心机、研钵、酶标仪、96孔板。

试剂组成和配制： 

提取液：液体110mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体30 mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加8mL试剂一充分溶解；用不完的试剂4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加8mL试剂一充分溶解；用不完的试剂4℃保存。

试剂四：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加4mL试剂一充分溶解；现配现用。

酶液提取：

1.组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清置冰上待测。

2.细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清置冰上待测。

3.液体：直接检测。