氨基酸代谢系列_谷草转氨酶(GOT/AST)测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/48样

注   意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

GOT（ 2.6.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基酸代谢的重要酶。此外，GOT在心肌细胞中含量最高，临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。

氨基酸代谢系列_谷草转氨酶(GOT/AST)测试盒

测定原理：

GOT催化 α-同戊二酸和天门冬-氨酸发生转氨基反应，生成谷-氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸；丙酮酸可与2,4-二硝-基苯肼反应生成2,4-二硝-基苯腙，在碱性条件下显棕红色；测定505nm吸光度的变化，即可计算GOT酶活力。

需自备的仪器和用品：

可见分光光计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体2.5 mL×1瓶， 4℃保存； 

试剂二：液体2.5 mL×1瓶， 4℃保存；

试剂三：液体25 mL×1瓶，4℃保存；

样品测定的准备：

1、细菌、细胞或组织样品的制备：

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。