氨基酸代谢系列_谷草转氨酶(GOT/AST)测试盒
氨基酸代谢系列_谷草转氨酶(GOT/AST)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GOT( 2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT在心肌细胞中含量,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
氨基酸代谢系列_谷草转氨酶(GOT/AST)测试盒
测定原理:
GOT催化 α-同戊二酸和天门冬-氨酸发生转氨基反应,生成谷-氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二硝-基苯肼反应生成2,4-二硝-基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定505nm吸光度的变化,即可计算GOT酶活力。
需自备的仪器和用品:
可见分光光计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体2.5 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂二:液体2.5 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂三:液体25 mL×1瓶,4℃保存;
样品测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。