土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)测试盒_土壤系列
土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)测试盒_土壤系列
测定方法:分光光度法
产品规格:50管/48样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷-氨酰胺水解成谷-氨酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)测试盒_土壤系列
测定原理:
S-GLS催化谷-氨酰胺水解成L-谷-氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。
需自备仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。
试剂组成和配制:
试剂一×1瓶,8 mL,4 ℃保存;
试剂二×1瓶,20 mL,4 ℃保存;
试剂三×1瓶,30 mL,常温保存;
试剂四×1瓶,10 mL,常温保存;
试剂五×1瓶,6 mL,常温保存;
试剂六×1瓶,6 mL,常温避光保存。
酶活性计算:
标准条件下测定的回归方程为y = 3.8488x +0.0057;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值A。
单位定义:每g土样每min催化谷-氨酰胺生成1nmol 氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS(nmol/min/g 土样)=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V反总÷W÷T×1000
=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。
V反总:反应体系总体积:1.05mL;T:反应时间,2h=120min;W:样本质量,g; 1000,μmol到nmol换算系数。