土壤系列_土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)测试盒
土壤系列_土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/96样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷氨-酰胺水解成谷-氨酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
土壤系列_土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)测试盒
测定原理:
S-GLS催化谷氨-酰胺水解成L-谷-氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。
需自备仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。
试剂组成和配制:
试剂一×1瓶,15 mL,4 ℃保存;
试剂二×1瓶,40 mL,4 ℃保存;
试剂三×1瓶,60 mL,常温保存;
试剂四×1瓶,5 mL,常温保存;
试剂五×1瓶,3 mL,常温保存;
试剂六×1瓶,3 mL,常温避光保存。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至420nm,蒸馏水调零。
2、样品测定(在EP管中加入下列试剂):
试剂名称(uL)测定管对照管
样本0.1
甲苯2525
振荡混匀,室温放置15min
试剂一100100
试剂二400400
混匀,37℃水浴2 小时
试剂三525525
混匀,8000 g,25℃离心10 min;取上清液,依次加入下列试剂
上清液130130
试剂四3030
试剂五2020
试剂六2020
混匀,室温静置15min,420nm处读取测定管和对照管吸光值,
计算ΔA=A测定管-A对照管。对照管只要做一管。