土壤系列_土壤亮-氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒
土壤系列_土壤亮-氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮-氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
土壤系列_土壤亮-氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒
测定原理:
S-LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备用品:
酶标仪/可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体35mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;
S-LAP测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至405nm,蒸馏水调零。
2、在试剂二瓶中加入15mL试剂一充分溶解(如较难溶解,可60℃水浴加热约30min促进溶解);用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3、操作表
试剂名称对照管测定管
新鲜土样(g)0.050.05
试剂一(μL)300
试剂二(μL)300
混匀, 37℃振荡反应1h后,8000g 4℃离心10min,S-LAP活力单位的计算:
取200μL上清液于微量石英比色皿或96孔板中,405nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。