果胶系列_果胶甲酯化程度测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/96样

注　意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分，除了起结构支撑、物质运输等作用外，还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。

果胶系列_果胶甲酯化程度测试盒

测定原理：

果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇，甲醇与 2,4-戊二酮反应显色，在 412nm 下测定吸光值；同时半乳糖醛酸在 70℃下与浓硫酸反应生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸，5-甲酰基-2-呋喃甲酸与 3,5-二甲基-苯-酚反应产生有色物质，在 450nm 下有大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。

自备实验用品及仪器：

天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。

试剂组成和配制：

提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 3mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 3mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 3mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂四：液体 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂五：粉剂×1 瓶，4℃避光保存；临用前加入 22mL 试剂六充分溶解待用，用不完的试剂 4℃避光保存。

试剂六：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。

试剂七：液体 3mL×1 瓶，4℃保存。

试剂八：液体 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。

酶液提取：

称取约 0.1g 组织，加入 1mL 蒸馏水，进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min，弃上清，留沉淀。沉淀中加入 1mL 提取液，混匀后 90℃水浴 2h，冷却至室温，10000g4℃离心 10min，取上清待测。