果胶系列_果胶甲酯化程度测试盒
果胶系列_果胶甲酯化程度测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/96样
注 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分,除了起结构支撑、物质运输等作用外,还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。
果胶系列_果胶甲酯化程度测试盒
测定原理:
果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇,甲醇与 2,4-戊二酮反应显色,在 412nm 下测定吸光值;同时半乳糖醛酸在 70℃下与浓硫酸反应生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸与 3,5-二甲基-苯-酚反应产生有色物质,在 450nm 下有大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。
试剂组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体 2.5mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂五:粉剂×1 瓶,4℃避光保存;临用前加入 22mL 试剂六充分溶解待用,用不完的试剂 4℃避光保存。
试剂六:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂七:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。
试剂八:液体 2.5mL×1 瓶,4℃避光保存。
酶液提取:
称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏水,进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min,弃上清,留沉淀。沉淀中加入 1mL 提取液,混匀后 90℃水浴 2h,冷却至室温,10000g4℃离心 10min,取上清待测。