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果糖6磷酸1磷酸转移酶PFP测试盒光合作用

  • 更新时间:  2022-08-01
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • 果糖6磷酸1磷酸转移酶PFP测试盒光合作用由上海纪宁生物公司提供,包括PFP检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍。
详细介绍

果糖6磷酸1磷酸转移酶PFP测试盒光合作用

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/48样

注   意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(PFP,EC2.7.1.90)是一种胞质酶,广泛存在于植物组织中,催化果糖-6-磷酸与果糖-1,6-二磷酸之间的可逆转化,在光合作用碳代谢中起重要作用。

果糖6磷酸1磷酸转移酶PFP测试盒光合作用

测定原理:

PFP催化6-磷酸果糖转化为1,6-二磷酸果糖,它在醛缩酶和磷酸丙糖异构酶的作用下转变为3-磷酸甘油醛,再由3-磷酸甘油醛脱氢酶和NADH催化生成3-磷酸甘油酸、NAD和磷酸,340nm处的吸光度变化反映了PFP的活性的高低。

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。

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试剂组成和配制:  

提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体30mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃避光保存。临用前加5mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加5 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂四:液体0.5mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂五:液体0.5mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂六:液体5mL×1瓶,4℃避光保存。

酶液提取:

1.组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置冰上待测。

2.细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置冰上待测。

3.液体:直接检测。

测定操作:

1.分光光度计预热30min,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2.取1mL石英比色皿,依次加入580μL试剂一,100μL试剂二,100μL试剂三,10μL试剂四,10μL试剂五,100μL试剂六,100μL粗酶液,充分混匀,记录340nm处10s的吸光值A1和310s的吸光值A2,

   △A=A1-A2


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