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氧化磷酸化系列_Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒

  • 更新时间:  2022-08-01
  • 产品型号:  100管/48样
  • 简单描述
  • 氧化磷酸化系列_Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒由上海纪宁生物公司提供,包括ATP酶检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍。
详细介绍

氧化磷酸化系列_Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒

测定方法:微量法

产品规格:100管/48样

注    意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

Ca++ Mg++-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。

氧化磷酸化系列_Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒

测定原理:

根据Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。

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需自备的仪器及用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体100mL ×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入6mL蒸馏水充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂三:液体 2mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存。用时加入3mL蒸馏水, 4℃保存。

试剂五:粉剂×1瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水,溶解后4℃保存一周。

试剂六:粉剂×1瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水,溶解后4℃保存一周。

试剂七:液体25mL×1 瓶,室温保存。

试剂八:10mmol/L 标准磷贮备液 10mL×1 瓶,4℃保存。

0.5μmol/mL 标准磷应用液配制:将试剂八 20倍稀释,即取 0.1mL试剂八加1.9mL蒸馏水充分混匀。

定磷剂的配制:按H2O: 试剂五:试剂六:试剂七=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。

注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。

样品酶液的制备:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。


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