氮代谢系列_硝酸还原酶NR测试盒NADH速率法

测定方法：微量法

产品规格：100管/96样

注　意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

NR（ EC 1.7.1.3）广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。

测定原理：

NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；NADH 在 340 nm 有最大吸收峰，通过测定 NADH 减少速率来表示 NR 活性。

需自备的仪器和用品：

酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

氮代谢系列_硝酸还原酶NR测试盒NADH速率法

试剂的组成和配制：

诱导剂储备液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。

提取液：液体 120mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 10mL×1 瓶，-20℃保存。

试剂二：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加 2mL 提取液溶解，现配现用。

诱导剂应用液的配制：用时将诱导剂储备液稀释 10 倍，即取 10mL 诱导剂储备液加 90mL

蒸馏水，充分混匀。

动植物组织样品的前处理：

（1）取适量诱导剂于烧杯中，将新鲜标本洗净，滤纸吸干，放入诱导剂应用液中（淹没即可），浸泡 2h，取出样本，滤纸吸干。

（2）按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

注意：

1、 建议使用新鲜没有冷冻过的样本。

2、 一般不要诱导处理，预测定结果没有活性（ΔA≤0）则需要诱导处理。