氮代谢系列_硝酸还原酶(NR)测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/96样

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

NR（ EC 1.7.1.3）广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。

 氮代谢系列_硝酸还原酶(NR)测试盒

测定原理：

NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰，可用分光光度法测定。

 需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

 试剂的组成和配制：

诱导剂储备液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体10mL×1瓶，-20℃保存。

试剂二：液体5mL×1瓶，-20℃保存； 

试剂三：液体6mL×1瓶，4℃保存（如出现结晶析出，60℃-90℃水浴溶解后使用）；

试剂四：液体6mL×1瓶，4℃保存。

试剂五：标准储备液1mL，-20℃保存。

诱导剂应用液的配制：用时将诱导剂储备液稀释10倍，即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水，充分混匀。

0.1umol/mL的标准液的配制：用时将试剂五稀释100倍，即取 0.1ml试剂五加9.9mL蒸馏水，充分混匀。

 样本前处理：

动植物组织样品的前处理:

（1）取适量诱导剂于烧杯中，将新鲜标本洗净，滤纸吸干，放入诱导剂应用液中（淹没即可），浸泡2h，取出样本，滤纸吸干。

（2）按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

注意：

1、 建议使用新鲜没有冷冻过的样本。

2、 一般不

要诱导处理，预测定结果没有活性（A测定≤A对照管）则需要诱导处理。