Fd谷-氨酸合成酶Fd-GOGAT测试盒_氮代谢系列

测定方法：分光光度法

产品规格：50管/24样

注　意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

Fd谷-氨酸合成酶Fd-GOGAT测试盒_氮代谢系列

测定意义：

GOGAT 广泛分布于植物中，和谷-氨酰胺合成酶共同构成 GS/GOGAT 循环，参与氨同化的调控。GOGAT 分为以 NADH 为还原剂的 NADH-GOGAT 和以铁氧还蛋白为还原剂的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT 主要存在于叶绿体基质中，与光合作用和光呼吸有关，主要同化NO3-还原和光呼吸产生的 NH4+。

测定原理：

Fd-GOGAT 催化谷-氨酰胺的氨基转移到 α-酮戊二酸，形成两分子的谷-氨酸，谷-氨酸脱氢酶催化谷-氨酸的脱氢反应，同时产生 NADH，使 WST-8 显橙黄色，在 450 nm 下测定吸光值。

需自备的仪器和用品：

分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 6mL 试剂六溶解待用，用不完的试剂 4℃保存；试剂二：液体 3mL×1 瓶，4℃避光保存；

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 5mL 蒸馏水溶解待用，用不完的试剂 4℃保存；试剂四：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入 50mL 试剂六溶解待用，用不完的试剂分装后-20℃保存；

试剂五：液体 6mL×1 瓶，4℃避光保存；

试剂六：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；

粗酶液提取：

按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。