谷-氨酰胺酶(GLS)测试盒_氮代谢系列
谷-氨酰胺酶(GLS)测试盒_氮代谢系列
测定方法:分光光度法
产品规格:50管/48样
注 意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GLS(EC 3.5.1.1)是酰胺基水解酶,催化天冬酰胺水解成谷-氨酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
谷-氨酰胺酶(GLS)测试盒_氮代谢系列
测定原理:
GLS催化谷氨-酰胺水解成L-谷-氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。
需自备仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一×1瓶,60 mL,4 ℃保存;
试剂二×1瓶,20 mL,4 ℃保存;
试剂三×1瓶,30 mL,常温保存;
试剂四×1瓶,10 mL,常温保存;
试剂五×1瓶,6 mL,常温保存;
试剂六×1瓶,6 mL,常温避光保存。
粗酶液提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量
(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);
8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,
加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。