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硝酸还原酶NR测试盒NADH速率法_氮代谢系列

  • 更新时间:  2022-07-29
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • 硝酸还原酶NR测试盒NADH速率法_氮代谢系列由上海纪宁生物公司提供,包括NR检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

硝酸还原酶NR测试盒NADH速率法_氮代谢系列

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/48样

注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

硝酸还原酶NR测试盒NADH速率法_氮代谢系列

测定意义:

NR( EC 1.7.1.3)广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。

测定原理:

NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;NADH 在 340 nm 有最大吸收峰,通过测定 NADH 减少速率来表示 NR 活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

诱导剂储备液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。

提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 20mL×1 瓶,-20℃保存。

试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加 4mL 提取液溶解,现配现用。

诱导剂应用液的配制:用时将诱导剂储备液稀释 10 倍,即取 10mL 诱导剂储备液加 90mL

蒸馏水,充分混匀。

动植物组织样品的前处理:

(1)取适量诱导剂于烧杯中,将新鲜标本洗净,滤纸吸干,放入诱导剂应用液中(淹没即可),浸泡 2h,取出样本,滤纸吸干。

(2)按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

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注意:

1、 建议使用新鲜没有冷冻过的样本。

2、 一般不要诱导处理,预测定结果没有活性(ΔA≤0)则需要诱导处理。

细菌或培养细胞的前处理:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。


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