蛋白酶系列_糜蛋-白酶(Chymotrypsin)测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/96样

注   意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

糜蛋-白酶，又称胰凝-乳蛋-白酶，是胰腺分泌的一种蛋白水解酶，能迅速分解变性蛋白质。糜蛋-白酶的功能与胰蛋-白酶相似，但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋-白酶用于痰液稀化，对脓性和非脓性痰液均有效；也用于创伤或手术后伤口愈合，如白内障摘除。

蛋白酶系列_糜蛋-白酶(Chymotrypsin)测试盒

测定原理：

糜蛋-白酶催化ATEE水解，产物在237 nm有特征光吸收；通过测定237 nm 光吸收增加速率，来计算糜-蛋白酶活性。

自备仪器和用品：

台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入20 mL蒸馏水充分溶解。

粗酶液提取：

组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。

测定步骤：

1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到237 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二置于37℃水浴中保温30min。

3. 空白管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL试剂一，200μL试剂二，混匀于237nm测定4min内吸光值变化，记为△A空白管。（从吸光值稳定增加开始计时）

4. 测定管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL粗酶液，200μL试剂二，混匀于237nm测定4min内吸光值变化，记为△A测定管。（从吸光值稳定增加开始计时）

注意：空白管只需要测定一次。