蛋白酶系列_酸性蛋-白酶(ACP)测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/48样

注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

ACP是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。

蛋白酶系列_酸性蛋-白酶(ACP)测试盒

测定原理：

酸性条件下，ACP催化酪蛋白水解产生酪-氨酸；在碱性条件下，酪-氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；钨蓝在680nm有特征吸收峰，通过测定其吸光度增加，来计算ACP活性。

自备仪器和样品：

水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸馏水。

试剂组成和配置：

液体一：2mL×1支，4℃保存。

液体二：1mL×1支，4℃保存。

试剂一的配制：临用前按液体一：液体二：蒸馏水=90（μL）：20（μL）：21（mL）的比例配制，现配现用，如出现白色絮状沉淀则不能用。 

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加4mL蒸馏水溶解。

试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入10mL试剂一，沸水浴中磁力搅拌溶解。（可在烧杯上盖一层保鲜膜，注意观察，避免水分全部蒸发，一般加热15-30分钟，该试剂为过饱和试剂，充分混匀后仍出现颗粒物不溶物不影响使用）。

试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入20mL蒸馏水溶解。

试剂五：液体4mL×1瓶，4℃保存。

标准品：液体1mL×1支，0.25μmol/mL标准酪-氨酸溶液，4℃保存。

粗酶液提取：

1、试剂一的配制：见试剂的组成和配制。

2、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。

3、血清或培养液：直接测定。

4、细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。