可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒_淀粉系列
可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒_淀粉系列
测定方法:分光光度法
产品规格:25管/24样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。
可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒_淀粉系列
测定原理:
SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。
需自备的的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体30mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:25mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入7mL试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入4mL试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入9mL试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂五:液体×1支,-20℃保存;临用前加入0.5mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存;临用前加入0.5mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
粗酶液制备:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。