ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒_淀粉系列
ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒_淀粉系列
测定方法:分光光度法
产品规格:25管/24样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸与ATP反应生成淀粉合成的直接前体ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步骤。
ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒_淀粉系列
测定原理:
AGP催化的逆向反应生成G1P,在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下测定NADPH增加速率,即可计算AGP活性。
需自备的的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂的组成和配制:
提取液:液体25mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入9mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入5mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
粗酶液制备:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。