α-淀-粉酶(α-AL)测试盒_淀粉系列

测定方法：分光光度法

产品规格：50管/24样

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

淀-粉酶负责水解淀粉，包括α-淀-粉酶和β-淀-粉酶。α-淀-粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。

测定原理：

还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。β-淀-粉酶不耐热，在70℃钝化15min，从而测定α-淀-粉酶活性。

α-淀-粉酶(α-AL)测试盒_淀粉系列

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

试剂一：25mL×1瓶，常温保存，若有黄色晶体析出，需90℃加热溶解后再用；

试剂二：20mL×1瓶，4℃保存，若有沉淀析出，需70℃加热溶解后再用。

粗酶液提取：

组织：称取0.1~0.2g样本（建议称取约0.1g样本），加1 mL蒸馏水匀浆；将匀浆倒入离心管中，在室温下放置提取15min，每隔5min振荡1次，使其充分提取；3000g，25℃离心10min，吸取上清液并且加蒸馏水定容至10 mL，摇匀，即为淀-粉酶原液。

血清（浆）：直接检测。

操作步骤和加样表（在1.5mLEP管中依次加入下列试剂）： 

1、分光光度计预热30min以上，调节波长到540 nm，蒸馏水调零。

2、试剂一或试剂二40℃预热10min

3、测定步骤

试剂（μL）对照管测定管

α淀-粉酶原液250250

70℃水浴15min左右，冷却

蒸馏水250

试剂二250

在40℃恒温水浴中准确保温5min

试剂一500500

混匀，95℃水浴5min，冷却， 540nm处读取对照管和测定管吸光度，计算ΔA=A测定管-A对照管。