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柠檬酸(CA)含量测试盒_三羧酸循环系列

  • 更新时间:  2022-07-28
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • 柠檬酸(CA)含量测试盒_三羧酸循环系列由上海纪宁生物公司提供,包括CA检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

柠檬酸(CA)含量测试盒_三羧酸循环系列

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/48样

注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

CA是生物体内常见的有机酸,是重要的食品风味物质。此外,CA是三羧酸循环第一步反应的产物。

柠檬酸(CA)含量测试盒_三羧酸循环系列

测定原理:

酸性条件下,柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。

自备仪器和用品:

可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

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试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体×1支,-20℃保存。

试剂四:粉剂×1瓶,室温保存。临用前配制,加入5mL试剂一,充分溶解。

试剂五:液体×1瓶,4℃避光保存。

标准品:液体×1支,250μmol/L柠檬酸标准液,4℃保存。

样品处理:

1.液体样品:取0.1mL液体加试剂一0.9mL,充分混匀,11000g, 4℃离心10min,取上清液待测。

2.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。11000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

3.线粒体:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,600g/min,4℃离心5min;取上清至另一EP管中,11000g,4℃离心10min,弃上清(此上清液可用于细胞质CA含量测定);向沉淀中加试剂二200μl,以及试剂三2μl,充分悬浮溶解,11000g,4℃离心10min,取上清液待测。

4.细菌、真菌中:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);11000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。


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