氧化与抗氧化系列_多功能氧化酶(MFO)测试盒
氧化与抗氧化系列_多功能氧化酶(MFO)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/96样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
多功能氧化酶又称混合功能氧化酶,可产生降解反应,可使原化学物质变为低毒的或无毒的物质从体内排出;还可产生激活反应,可使原化学物质转化为具有亲电子性质,导致毒性增强,成为致突变物或终致癌物。近年来对混合功能氧化酶系与外源性化学物质相互作用的深入研究,对于从分子生物学水平上进一步了解外源性化学物质的毒作用具有重要意义。
氧化与抗氧化系列_多功能氧化酶(MFO)测试盒
测定原理:
MFO催化对硝基苯甲醚,在400nm下有特征吸光值。
自备用品:
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、蒸馏水、氯仿。
试剂组成和配制:
提取液:液体120mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体24mL×1瓶,4℃避光保存;
试剂二:粉剂×3管,-20℃保存;临用前取一管加入1.5mL水溶解,现配现用。
试剂三:液体24mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体64mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
按照组织质量(g):提取液(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心20min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1、酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm。
2、在EP管中依次加入如下试剂
试剂名称(μL)测定空白
试剂一200200
试剂二4040
提取液160360
样本200
混匀,37℃水浴30min
试剂三200200
分别加入1000μL氯仿,充分混匀萃取,静置10min,取下层氯仿层0.6mL至新的EP管中。再加入试剂四0.6mL,充分混匀萃取,取上层水相0.2mL于96孔板中,400nm下测定吸光值A测定与A空白,△A=A测
定-A空白。空白管只需测一管。