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氧化与抗氧化系列_非蛋白质巯基测试盒

  • 更新时间:  2022-07-28
  • 产品型号:  100管/48样
  • 简单描述
  • 氧化与抗氧化系列_非蛋白质巯基测试盒由上海纪宁生物公司提供,包括非蛋白质巯基检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

氧化与抗氧化系列_非蛋白质巯基测试盒

测定方法:微量法

产品规格:100管/48样

注   意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能,对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义

氧化与抗氧化系列_非蛋白质巯基测试盒

测定原理:

巯基基团与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在412nm处有最大吸收峰。

自备实验用品:

天平、研钵、恒温水浴锅、酶标仪、96孔板、乙醇和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体100 mL×1瓶,4℃保存。 

试剂一:液体18 mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体1mL×1管,4℃避光保存。 

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样品的制备:

1.按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2.血清,培养液:取0.1mL样本,加入0.4mL提取液,混匀,室温静置10min, 然后8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

计算公式:

非蛋白巯基标准曲线:y = 1.8111x - 0.0037,R2 = 1,x为标品浓度,单位μmol/mL,y为吸光度ΔA。

1. 组织:

(1)按样本重量计算

非蛋白巯基含量(μmol/g 鲜重)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×V样总÷W

=0.552×(ΔA+0.0037)÷W

(2)按样本蛋白浓度计算

非蛋白巯基含量(μmol/mg prot)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×V样总÷Cpr

=0.552×(ΔA+0.0037)÷Cpr

2. 血清、培养液:

非蛋白巯基含量(μmol/L)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×5×103

=2761×(ΔA+0.0037)

V样总:加入提取液体积,1mL;W:样品质量,g ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;5:血清,培养液等液体样本稀释倍数;103 :1mmol/ L=103μmol/ L


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