氧化与抗氧化系列_单宁酶(TAN)测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/48样

注   意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

单宁酶全称是单宁酯酰水解酶(Tannase，EC 3.1.1.20)，它可以水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚羧键，生成没食子酸和葡萄糖。

氧化与抗氧化系列_单宁酶(TAN)测试盒

测定原理：

使用抗氧化剂没食子酸丙酯（PG）作为单宁酶酶促反应的底物，在270nn下测定底物PG反应前后的光密度变化,计算单宁酶酶活力。

需自备的的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制：

试剂一：液体100mL×2瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×1支，4℃保存；临用前每支加入6mL试剂一，充分溶解后备用；用不完的试剂4℃保存；

粗酶液提取：

按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

液体样本：直接取上清测定。

测定步骤：

1、分光光度计预热30min以上，调节波长到270 nm，蒸馏水调零。

2、加样表

试剂名称（μL）对照管测定管

95℃水浴5min后灭活的粗酶液50

粗酶液50

试剂二5050

混匀，40℃准确保温10 min后，置95℃水浴中10 min（盖紧，防止水分散失），冷却

试剂一900900

混匀，取200uL至微量石英比色皿或96孔UV板中，270nm处读取各管吸光值。计算ΔA=A对照-A测定。每个测定管需设个一个对照管。