氧化与抗氧化系列_总巯基测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/48样

注   意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

生物体内巯基主要包括GSH巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质，而且参与活性氧清除，后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量，能够间接测定蛋白质巯基含量。

氧化与抗氧化系列_总巯基测试盒

测定原理：

巯基基团与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在412nm处有最大吸收峰。

自备实验用品：

天平、研钵、恒温水浴锅、酶标仪、96孔板、乙醇和蒸馏水。

试剂组成和配制： 

试剂一：液体18mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体1mL×1管，4℃避光保存。 

样品的制备：

1.按照组织质量（g）：水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2.血清，培养液：稀释5倍后测定，可取0.1mL样本，加入0.4mL蒸馏水，混匀，置冰上待测。

操作步骤：

1、酶标仪预热30min，调节波长至412nm。

2、操作表

在96孔板中加入如下试剂

对照管测定管

样品（μL）4040

试剂一（μL）150150

试剂二（μL）10

乙醇（μL）10

混匀，25℃静置10min，测定412nm吸光值。ΔA=A测定-A对照。每个测定管设一个对照管。