氧化与抗氧化系列_超氧阴离子(OFR)测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/96样

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。

氧化与抗氧化系列_超氧阴离子(OFR)测试盒

测定原理：

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成 NO2－，NO2－在对氨基苯磺酸和 α－萘胺的作用下，生成红色的偶氮化合物，在 530nm 处有特征吸收峰，根据 ΔA 值可以计算样品中 O2－含量，反应式

为NH2OH + 2O2－  ＋H＋  → NO2－  ＋ H2O2 ＋ H2O。

自备实验用品及仪器：

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、氯仿和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：液体 110mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂三：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂四：氯仿，自备。

超氧阴离子提取：

1.　植物、动物组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后，10000g，4℃，离心 20min，取上清置于冰上待测。

2.　细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 20min，取上清置于冰上待测。

3.　血清或培养液：直接测定。