氧化与抗氧化系列_蛋白质羰基测试盒
氧化与抗氧化系列_蛋白质羰基测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意 :正式实验之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
蛋白质羰基是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志,其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小,是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
氧化与抗氧化系列_蛋白质羰基测试盒
测定原理:
羰基与2--肼反应生成红色2--腙,在370nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水、无水乙醇、乙酸乙酯。
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂0.1g×5支,4℃避光保存。(使用前根据样品数,每支加1mL水溶解,每支为10个样品用量)
试剂二:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体6mL×1瓶,4℃保存。
试剂四:液体15mL×1瓶,4℃保存。
试剂五:根据测定样品量,将乙酸乙酯和无水乙醇等体积混合。
试剂六:液体60mL×1瓶,4℃保存。
样品处理:
1.组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,于4℃,4000g离心10min,取上清,加入0.1mL试剂一,室温放置10min,4℃,10000g离心10min,取上清待测。
2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
3.血清等液体样本:直接测定。