氧化与抗氧化系列_--解氨酶(TAL)测试盒
氧化与抗氧化系列_--解氨酶(TAL)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
TAL广泛存在于植物和微生物中,是苯--代谢途径的关键酶之一。TAL能够跃过肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)直接将--转化为香豆酸,香豆酸可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素类天然产物。
氧化与抗氧化系列_--解氨酶(TAL)测试盒
测定原理:
TAL能够分解--产生香豆酸,使反应溶液333nm下的吸光度随反应时间而上升,根据吸光度的变化率可计算出TAL活性。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板(UV板)、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存;
试剂三:液体5mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)果汁等液体样品:直接检测。
测定步骤:
1、酶标仪预热30min以上,调节波长至333nm。
2、准备96孔UV板一块(非普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于340nm务必使用UV板)。
3、试剂二的配置:临用前在试剂二瓶中加入10mL试剂一充分溶解待用(用不完的试剂4℃保存一周,注意现配现用),在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上。