氧化与抗氧化系列_葡萄糖氧化酶(GOD)测试盒
氧化与抗氧化系列_葡萄糖氧化酶(GOD)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意 :正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GOD(EC 1.1.3.4)广泛存在于动物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生H2O2,是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。
氧化与抗氧化系列_葡萄糖氧化酶(GOD)测试盒
测定原理:
GOD催化产生H2O2,过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基偶联酚,生成有色化合物,在500 nm有特征吸收峰,颜色深浅与GOD活性成线性关系。
试验中所需的仪器和设备:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
缓冲液:液体30mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10mL缓冲液充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存一个月;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10mL缓冲液充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存一个月;
样品测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。